Laboratorně lze stanovovat koncentraci proteinu imunologickými technikami nebo enzymovou, katalytickou koncentraci pomocí specifických substrátů. Při stanovení jak hmotnostní, tak katalytické koncentrace enzymu je nutno zvažovat přítomnost inhibitorů v séru a vznik makroforem enzymů. Běžně používané stanovení aktivity a-amylázy je založeno na štěpení chromogenního substrátu. Starší postupy, které používaly deriváty přirozeného substrátu-škrobu, byly obtížně standardizovatelné a již se nepoužívají. Současné syntetické substráty jsou odvozeny od maltózy, jako chromogen je nejčastěji používán 4-nitrofenylfosfát. Stanovení isoenzymů a-amylázy je umožněno inhibicí jednoho z obou isoenzymů specifickou monoklonální protilátkou.
Pro POCT metody existují biosenzory se škrobovými nanočásticemi.
Zvýšená hladina celkové aktivity a-amylázy je prokazatelná u celé řady onemocnění. Nejčastějším diagnostickým důvodem je dg. akutní pankreatitidy. Hladina celkové a-amylázy je sice zvýšena ve 100% onemocnění akutní pankreatitidou, zvýšena je však i v 80% všech případů akutních bolestí břicha. Podstatně větší diagnostický přínos má stanovení pankreatického izoenzymu (P-amylázy), jehož hladina je rovněž zvýšena ve 100% případů akutní pankreatitidy, u akutních bolestí břicha je zvýšena jen v 10%. V běžné klinické praxi se používá kriteria 5-násobného zvýšení celkové amylázy, které je dg.indikátorem akutní pankreatitidy. Zvýšená sérová hladina je samozřejmě prokazatelná u akutních i chronických onemocnění ledvin, u střevních zánětů ve 30% případů akutní apendicitidy. Zvýšení hladiny a-amylázy v moči u akutní pankreatitidy přetrvává déle a nastupuje později, než zvýšení hladiny v séru. Slinný typ a-amylázy (S-amyláza) je zvýšen u onemocnění slinných žlaz, u některých plicních chorob, u řady maligních tumorů, ovariální cysty, mimoděložního těhotenství. Normální hodnoty poměru clearance amylázy a kreatininu jsou mezi 2-4%, při pankreatitidě stoupá index na 10%. Zvýšený index clearance amylázy-kreatininu byl prokázán např. u diabetické ketoacidózy, popáleninách, myelomu a u ledvinných poruch. Snížení indexu clearance je diagnosticky významné pro makroamylázemii.
Existují i specifické metody pro stanovení slinné a-amylázy, např. ELISA s monoklonální protilátkou.
Reference
Jalal M. - Frontline Gastroenterol. 2024,
Medline - link
Bush N. - Curr Opin Gastroenterol. 2023,
Medline - link
Ekka NM. - Cureus. 2023,
Medline - link
Ko J. - Diabetes Res Clin Pract. 2020,
Medline - link
Dehghani Z. - Anal Bioanal Chem. 2019,
Medline - link
Mandal N. - Biosens Bioelectron. 2019,
Medline - link
Rompianesi G. - Cochrane Database Syst Rev. 2017,
Medline - link
Gubergrits N. - Pancreatology. 2014,
Medline - link
Terui K. - BMC Pediatr. 2013,
Medline - link
Gomez D. - BMJ Open. 2012,
Medline - link
Canalias F. - Clin Chim Acta. 2010,
Medline - link
Carroll JK. - Am Fam Physician. 2007,
Medline - link
Kocna P. - Cas Lek Ces. 2006,
Medline - link
Quarino L. - J Forensic Sci. 2005,
Medline - link
Smith RC. - ANZ J Surg. 2005,
Medline - link
Panteghini M. - Clin Chem Lab Med 2002,
Medline - link
Treacy J. - ANZ J Surg 2001,
Medline - link
Pezzilli R. - Dig Liver Dis 2000,
Medline - link
Keim V. - Pancreas 1998,
Medline - link
Chase CW. - Am Surg 1996,
Medline - link
Malfertheiner P. - Ann Ital Chir 1995,
Medline - link